如何清潔和保養(yǎng)色譜儀的色譜柱？

更新時間：2025-07-15

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色譜柱是色譜儀的核心部件，其性能直接影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。以下是針對液相色譜柱（HPLC）和氣相色譜柱（GC）的清潔、保養(yǎng)及維護(hù)要點，按場景分步驟說明：
一、液相色譜柱（HPLC）的清潔與保養(yǎng)

操作步驟：

避免水相和高濃度有機(jī)相直接混合（可能析出鹽或產(chǎn)生沉淀），需用中間過渡溶劑（如 50% 甲醇水）過渡。

沖洗時壓力需低于色譜柱最高耐受壓力（通常標(biāo)注于柱標(biāo)簽，如 200 bar），流速不宜過高。

注意：

直接用流動相相同的純有機(jī)相沖洗 20-30 分鐘，確保無樣品殘留。

先用低濃度有機(jī)相（如 10% 甲醇 / 乙腈水溶液）以 0.3-0.5 mL/min 流速沖洗 30 分鐘（稀釋并帶出鹽類）。

再用純有機(jī)相（甲醇 / 乙腈）沖洗 30 分鐘以上（溶解脂溶性雜質(zhì)，如油脂、聚合物）。

水相 / 緩沖鹽體系流動相：

純有機(jī)相流動相：

深度清潔（柱效下降或污染時）
判斷標(biāo)準(zhǔn)：峰形展寬、拖尾加重、保留時間漂移或柱壓升高。
清潔方案（按污染類型選擇）：
污染物類型推薦清洗溶劑及步驟注意事項
蛋白質(zhì) / 生物樣品 1. 0.1-0.5 mol/L 氫氧化鈉溶液（或?qū)Ｓ弥逑磩?.2-0.3 mL/min 流速沖洗 30-60 分鐘。
純水沖洗至中性。
純有機(jī)相封存。僅適用于耐堿性色譜柱（如 C18 柱需確認(rèn) pH 耐受范圍）。
疏水性雜質(zhì)（油脂） 1. 依次用甲醇→二氯甲烷→甲醇沖洗，每種溶劑 0.3 mL/min 流速沖洗 30 分鐘（溶解強(qiáng)疏水物質(zhì)）。
最后用初始流動相平衡。二氯甲烷需注意兼容性，避免損傷柱固定相。
鹽類結(jié)晶 1. 純水或低濃度甲醇水（10%）沖洗至鹽溶解。
純有機(jī)相沖洗封存。避免直接用純有機(jī)相沖洗，防止鹽析出堵塞管路。
金屬離子污染 1. 0.1 mol/L 乙二胺四乙酸（EDTA）溶液沖洗 30 分鐘。
純水沖洗→純有機(jī)相封存。適用于固定相含金屬配位基團(tuán)的色譜柱。
操作技巧：
反向沖洗（僅適用于允許反沖的色譜柱，查看柱標(biāo)簽 “→" 方向）：從檢測器端（柱出口）向進(jìn)樣端（柱入口）沖洗，可有效清除柱頭堵塞物。

超聲輔助：若柱壓過高，可將柱前篩板拆下，用乙醇超聲清洗 10 分鐘（小心操作，避免破壞篩板）。

長期（1 個月以上）：

沖洗后，用純甲醇或乙腈封存。

兩端用不銹鋼堵頭密封，避免柱床干燥（干燥會導(dǎo)致固定相塌陷）。

存放于陰涼干燥處，避免陽光直射。

二、氣相色譜柱（GC）的清潔與保養(yǎng)

操作步驟：

斷開檢測器連接（避免污染檢測器），將柱出口端置于通風(fēng)處。

以高于日常使用溫度 20℃ 的條件（不超過柱最高使用溫度），通載氣（流速 1-2 mL/min）老化 2-4 小時。

老化結(jié)束后，降至室溫再連接檢測器。

操作步驟：

關(guān)閉氣源，卸下色譜柱，用專用切割工具（如陶瓷切片）在柱入口端切割 10-20 cm（確保切口平整）。

重新安裝色譜柱，老化后測試柱效。

處理方法：

輕度流失：通過老化（逐步升溫至最高溫度并維持）去除表面污染物。

重度流失：需更換色譜柱（固定相）。

存放于干燥、無腐蝕性氣體的環(huán)境中，避免彎曲或擠壓（毛細(xì)管柱尤其脆弱）。

三、通用保養(yǎng)原則